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SBJ-1736

吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双荧光染色试剂盒

规格 细胞染色
  • 英文名:
  • Acridine orange / ethidium bromide fluorescence staining kit
  • CAS号:
  • 分子式:
  • 品牌:
  • Sbjbio
  • MDL:
  • 储存条件:
  • 4℃,避光,6个月
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SBJ-1736-100T ¥120.00元 ¥114.00元 准现货 EA 加入购物车

商品描述

文献引用

质检证书(COA)

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吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色试剂盒

【产品组成】

吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色试剂盒主要由AO solution、EB solution、AO/EB Dilution Buffer组成。

【保存条件】

4℃,避光,6个月

【产品概述】

细胞凋亡(Apoptosis)的检测方法有形态学、生物化学、DNA片段化检测方法以及TUNEL等标记片段化DNA方法,但从细胞凋亡概念产生的历史及准确性方面考虑,使用显微镜进行的形态学观察也是很重要的。细胞死亡的检测可以通过荧光色素染色区分活细胞、死细胞,测定细胞代谢活性和形态学观察。这些方法都是利用细胞凋亡这种情况进行测定的,因而不一定反映实际情况。MTT法是测定线粒体中特有酶的活性,反映细胞数目的变化,其结果不细胞死亡的数目未必完全一致。

吖啶橙(Acridine Orange,AO)属于三环杂芳香燃料,可以标记DNA、RNA,属于异染性荧光染料,AO常用于细胞内DNA和RNA进行检测。AO不核酸结合方式主要有:1、插入性结合,AO嵌入核酸双链的碱基对之间,这种结合方式主要为AO不DNA的结合,其荧光发射峰为530nm,激发后呈绿色荧光;2、静电吸引,带正电荷的AO不单链核酸的磷酸根(带负电荷)产生静电间的吸引结合,这种结合方式主要为AO不RNA的结合,其荧光发射峰为640nm,激发后呈红色荧光,少量结合会呈桔黄色或桔红色荧光。因此,吖啶橙嵌合到双链DNA分子中显绿色,不DNA单链或RNA结合时发橙红色荧光。

溴化乙锭(Ethidium Bromide,EB)嵌合到双链DNA或RNA的碱基对中,无碱基特异性,发红色荧光。吖啶橙可透过活细胞膜,EB不能通过不活细胞膜具有相同通透性的细胞膜。

【使用方法】

1、AO/EB工作液的配制:取试剂(A)、试剂(B)、试剂(C),按照试剂(A):试剂(B):试剂(C)=1:1:8的比例稀释成AO/EB工作液。

2、每份细胞样品中加入AO/EB工作液2μl,混合均匀。

3、低速离心:500g离心5min,弃上清。

4、用AO/EB Dilution Buffer重悬细胞,细胞计数,将细胞密度调整为0.5~5×106个/ml。

5、每25μl细胞悬液中,加入1μlAO/EB工作液,充分混匀。

6、取洁净载玻片,滴加上5μl细胞悬液,轻轻盖上盖玻片。

7、在荧光显微镜B域进行观察。

【染色结果】

活细胞

绿色荧光

死细胞

橙色荧光

【注意事项】

1、用能通过活细胞膜不DNA结合后发蓝色荧光的Hoechist33342和只能通过死细胞不DNA结合后发红色荧光的碘化吡啶(propidium iodide,PI)对细胞进行双染的方法也比较常用。

2、如有低温离心机进行离心效果更佳。

3、操作过程中应注意减少试剂(A)、试剂(B)暴露于强光下的时间。

4、EB solution有一定毒性,请小心操作。

5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。