英文名称：B16-F10

中文名称：小鼠皮肤黑色素瘤细胞

种   属：鼠源

组织来源：器官；皮肤；品系：C57BL/6J；疾病；黑色素瘤

生长特性：贴壁生长

细胞形态：梭形细胞样；上皮细胞样

传代比例：1:2 ~ 1:4

换液频率：2~3次/周

倍增时间：48-72h

培养体系：DMEM（高糖）+10%FBS+1%P/S

培养条件：5%CO2；37 ℃

冻存条件：Biochannel细胞冻存液，程序降温，液氮长期保存。

【细胞培养特点】

1. 该细胞在DMEM(含1.5g/L NaHCO3)培养基中生长良好，大部分品牌的DMEM含有较高浓度的NaHCO3（3.7g/L），若使用DMEM（3.7g/LNaHCO3）培养基培养细胞时需要提高CO2浓度（7%-10%）。

2. 该细胞我们推荐的基础培养基是DMEM（高糖）培养基；

3. 据反映DMEM养B16-F10，细胞会很黑，分泌黑素量比较多；而1640养比较白，黑素分泌量比较少。（依据实验需求可尝试更换培养体系，更换时建议留种）；

4.更换为DMEM培养液培养时，请保证血清和培养液质量，不然营养问题会导致细胞不长、生长缓慢以及黑色素大量分泌。

【常见问题】

Q: 收货时细胞出现伪足，或是碎片较多怎么办？

A：受到运输影响，悬浮细胞会短暂性出现形态改变的现象，如伪足等。通过传代培养，1周左右可以恢复正常。一些细胞在运输途中死亡而产生碎片，通过传代离心可以去除（见上文传代篇）。

Q：培养过程中细胞发生贴壁怎么办？

A: 少量细胞贴壁属于正常情况，将细胞悬液转移至新瓶中即可。当贴壁细胞的比例高于20%，说明细胞生长环境有异常，需排查培养箱设置、培养基成分，以及培养器皿是否异常。

Q：培养过程中细胞发生聚团怎么办？

A：少量细胞聚团，呈葡萄串状，属于正常现象，特别是细胞密度较低时，易出现这种情况。更换血清品牌或增大血清比例（不超过20%）有助于解决聚团问题。不建议将聚团的细胞吹散，等待密度高时，会自己分散开。

Q：培养基里一定要加β-巯基乙醇吗？

A：β-巯基乙醇是一种常用的培养补充剂，有抗氧化的作用，可减少氧化应激对THP-1细胞的影响。当细胞密度过大但需要维持时，可适当增加巯基乙醇的比例（不超过标准量的1.5倍）。

Q：镜下观察时，难以聚焦或估算密度怎么办？

A：悬浮细胞会随着液体流动，不容易聚焦，静置5-10min使细胞沉底，之后在轻轻放上显微镜观察，将有助于聚焦和估算细胞密度。

【森贝伽细胞优势】

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