首先我们需要区分原代细胞和细胞系的概念：

原代细胞(primary cell)是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞。

细胞系(cell line)是原代细胞经首次传代成功后即为细胞系。其中能够连续传代的细胞叫做连续细胞系或无限细胞系，不能连续培养的称为有限细胞系。人类肿瘤细胞，在体外培养半年以上，生长稳定，并连续传代的即可称为连续性株或系。

原代细胞培养之组织取材

原代细胞最接近和最能反映体内生长特性，适宜用于药物敏感性试验、细胞分化等实验研究。

原代细胞的培养方法

组织块培养法：

将剪成的小组织团块接种于培养瓶（或皿）中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

消化培养法：

该方法是源于消化分散法，将妨碍细胞生长的细胞间质（包括基质、纤维等）去除，使细胞分散形成细胞悬液，然后分瓶培养。

悬浮细胞培养法：

对于悬浮生长的细胞，如淋巴细胞、骨髓细胞、和免疫细胞等无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

器官培养：

从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，其特性仍保持原有器官细胞的组织结构和联系、并能存活。

注意事项：

注意事项

1. 培养液和培养物的比例：一定浓度的培养物仅能支持一定数量的细胞生长，不能盲目增加每单位体积的细胞浓度。

2. pH：初培养pH应为7.4，培养过程中应不低于7.0。

3. 培养瓶内的空间：一般培养瓶内培养液与液面上的空间体积之比为1:10。

细胞系培养

细胞系常见生长方式分为贴壁细胞和悬浮细胞

悬浮细胞传代步骤

直接传代法

1、待悬浮细胞长满至80%～90%（细胞悬液变黄），即可传代；

2、用吸管吸弃细胞悬液 1 /2～1 / 3；

3、加入适量的新鲜培养基，继续培养。

离心传代法（在发现有细胞碎片的情况下）

1、将细胞悬液转移到离心管内；

2、150 g 离心 5 min，弃去上层清液；

3、使用新鲜的培养基重悬细胞；吸管吸取适量细胞悬液，装入新的培养瓶，      再加入适量的新鲜培养基，继续培养。

贴壁细胞传代步骤

清洗—消化—终止—标记