衰老or老化

细胞衰老是指稳定细胞周期停滞的状态，在这种状态下增殖细胞会对促生长刺激产生耐受，通常由 DNA 损伤所引起。Leonard Hayflick 首先描述了细胞衰老，他观察到人类胎儿成纤维细胞最终会停止分裂，但在长时间培养后仍然具有活力和代谢活性。现在普遍认为，除了具有干细胞样特性的细胞类型外，只有转化的恶性细胞会无限复制，而非转化细胞则不会。除了在体外受控条件下发育的胚胎干细胞或诱导多能干细胞，此类细胞还包括内源性生殖干细胞和成体干细胞。衰老细胞与静息细胞和终末分化细胞均不同，其中静息细胞能够重新进入细胞周期。

衰老细胞的特征是形态学和代谢变化、染色质重构、基因表达改变以及出现一种称为衰老相关分泌表型 (SASP) 的促炎症表型。衰老的生物学作用复杂，衰老细胞的保护作用和有害作用均已有描述，主要取决于生理环境。例如，尽管衰老可能作为避免受损细胞恶性转化的机制进化而来，但衰老的发生可能会导致许多年龄相关病变，包括癌症、组织退化和炎症性疾病。

老化和细胞衰老这两个术语不能互换使用。老化是随时间推移的进行性衰退，而衰老在整个生命周期中都可发生，包括胚胎发生期间。衰老细胞的数量随着年龄增大而增加，但衰老还在发育以及伤口愈合中发挥重要作用。

老化是什么

老化是生命发展的必然，任何细胞从诞生之时起，老化过程就开始了。老化的细胞结构蛋白、酶蛋白和受体蛋白合成减少，摄取营养和修复染色体损伤的能力均下降，表现为细胞和胞核变形，线粒体、高尔基体扭曲或呈囊泡状，胞质色素沉着，细胞体积缩小，由此导致器官重量减轻，间质增生硬化，功能代谢降低，储备功能不足。

肉眼显微镜下观察细胞主要镜下特征：

1、细胞内部会出现空泡（可能是凋亡小体），也可能会出现黑点，大多沿细胞周边排布，内部中间也可能会显现一些，但相对周边为少。

2、老化以后的细胞会出现形态的改变，立体感会慢慢消失，开始成扁平状，细胞与细胞之间的间隔减小或混在一起，细胞不再是梭形，而会成为各种不规则形状。

3、细胞折光性变差，镜下可见细胞“变薄”，做转染实验时，细胞死亡率会较高。但培养液不会发生迅速变黄的现象，仍清亮。

4、细胞的贴壁性减弱，开始有细胞漂浮于培养液中。

5、老化的细胞，表面分泌物会增多，细胞表面的纯净度越来越低。

6、分裂的细胞数量明显地减少同时细胞的增殖速度也会大大下降。

7、细胞开始长角分化。

老化的原因

1、氧化应激：由内在或外在因素引起的氧化压力会加速细胞老化。

2、端粒缩短：端粒是染色体末端的保护结构，其缩短会导致细胞分裂次数有限，从而引发细胞老化。

3、细胞自噬功能降低：细胞自噬是细胞内部清理和修复机制的一部分，功能降低会导致细胞老化。

4、营养不足：培养液中的营养成分不足也会导致细胞老化。

5、传代次数过多：在体外培养过程中，细胞传代次数过多或时间过长也会引起细胞老化。

如何预防细胞老化

1、不要等细胞长得太满才传代。细胞太密会导致细胞状态下降，产生细胞接触性抑制。一般密度到80-90%左右就可以传代了。

2、细胞不要消化过度。采用胰蛋白酶消化细胞，会造成细胞表面一定程度的细胞损伤。一定要注意选用的胰酶品牌，使用的胰酶量，绝大多数细胞使用0.25胰酶含edta这款消化液，t25瓶1ml，培养箱消化1min即可拿出来在显微镜下看细胞脱落情况。

3、最重要的是使用优质的血清和培养基：干细胞对培养基中的内毒素非常敏感。除了要留意基础培养基的内毒素外，也要留意血清的内毒素。如果血清中内毒素≥3EU/ml时，干细胞很容易老化或死亡，导致细胞“亚健康”状态，导致实验受到影响。很多使用者，在血清在试用前，就会通过提早审核该批次《检测报告》，以决定是否入围进行试用。

4、在开始养细胞并传代时，也要特别注意冻存细胞，以保持细胞有种子库存在，可以有效避免细胞损伤