BL-O010 |
EDTA脱钙液 |
规格 | 500mL |
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【货号】 BL-O010
【规格】 500mL
【保存】 室温,12 个月。
【产品简介】 在组织切片过程中,一些含钙组织不能直接制作切片,因为钙和石蜡的密度不同,较 难切出完整的切片。为达到骨组织既充分脱钙,又保护组织的抗原不受破坏,需要对含钙 组织固定之后再进行脱钙或采用固定兼有脱钙的液体处理,然后再进行常规制片。用于脱 钙的试剂很多,脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸(EDTA)等。EDTA 是一种相对 较好的螯合脱钙剂,对组织结构影响最小,可以较好的保存组织的某些酶类,经 EDTA 脱 钙后的组织可以进行免疫组化和原位杂交染色。但是该法脱钙速度太慢,一般脱需要数周 至数月。 EDTA 脱钙液主要由 EDTA、磷酸盐等组成,pH 值为 7.2。EDTA 脱钙液的特点是组 织染色结果好,对组织的结构损害小。但是 EDTA 脱钙速度很慢,且脱钙后组织会稍微变 硬。
【使用方法】 1、骨组织脱钙时,取材不易过厚,一般大约 5mm。
2、组织固定后,用 PBS 清洗 3 次,每次 20min。
3、组织用蒸馏水洗清洗 3 次,每次 20min。
4、组织转移至 20~30 倍体积的 EDTA 脱钙液中,脱钙 10~30 天或更长时间。如果想 加快脱钙速度,可以置于 37℃进行脱钙。如果必要,更换新的 EDTA 脱钙液继续脱钙,多数组织脱钙 2 周~3 个月即可,每周更换一次直至终点。
5、用蒸馏水冲洗数次。
6、常规脱水、包埋。
【注意事项】 1、厚度 5mm 的骨组织块脱钙时间一般脱钙 10~30 天即可。
2、适当加温能加快脱钙的速度,一般不应超过 37~40℃,温度过高容易使骨组织造成 松散解体,尤其不可大于60℃。
3、脱钙应彻底,防止脱钙不足或过度。不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间,每隔一段时间检测一次脱钙程度,避免脱钙过度,脱钙过度会增加组织的损伤程度,影响染色结果。以免脱钙过长引起组织损害。
4、脱钙用具避免使用金属容器,尽量使用玻璃容器。
5、骨组织脱钙应先固定后脱钙或固定、脱钙同时进行,不应先脱钙后固定,以便减少 组织的损伤程度。
6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。