BL-O010 |
EDTA脱钙液 |
规格 | 500mL |
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【货号】 BL-O010
【规格】 500mL
【保存】 10~30℃,12个月。
【产品简介】
在组织切片过程中,一些含钙组织不能直接制作切片,因为钙和石蜡的密度不同,较难切出完整的切片。为达到骨组织既充分脱钙,又保护组织的抗原不受破坏,需要对含钙组织固定之后再进行脱钙或采用固定兼有脱钙的液体处理,然后再进行常规制片。用于脱钙的试剂很多,脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸(EDTA)等。EDTA是一种相对较好的螯合脱钙剂,对组织结构影响最小,可以较好的保存组织的某些酶类,经EDTA脱钙后的组织可以进行免疫组化和原位杂交染色。但是该法脱钙速度太慢,一般脱需要数周至数月。
EDTA 脱钙液主要由EDTA、磷酸盐等组成,pH值为7.2。EDTA脱钙液的特点是组织染色结果好,对组织的结构损害小。但是EDTA脱钙速度很慢,且脱钙后组织会稍微变硬。
【使用方法】
1、骨组织脱钙时,取材不易过厚,一般大约5mm。
2、组织固定后,用PBS清洗3次,每次20min。
3、组织用蒸馏水洗清洗3次,每次20min。
4、组织转移至20~30倍体积的EDTA 脱钙液中,脱钙10~30天或更长时间。如果想加快脱钙速度,可以置于37℃进行脱钙。如果必要,更换新的EDTA 脱钙液继续脱钙,多数组织脱钙2周~3个月即可,每周更换一次直至终点。
5、用蒸馏水冲洗数次。
6、常规脱水、包埋。
【注意事项】
1、厚度 5mm 的骨组织块脱钙时间一般脱钙 10~30 天即可。
2、适当加温能加快脱钙的速度,一般不应超过 37~40℃,温度过高容易使骨组织造成松散解体,尤其不可大于 60℃。
3、脱钙应彻底,防止脱钙不足或过度。不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间,每隔一段时间检测一次脱钙程度,避免脱钙过度,脱钙过度会增加组织的损伤程度,影响染色结果。以免脱钙过长引起组织损害。
4、脱钙用具避免使用金属容器,尽量使用玻璃容器。
5、骨组织脱钙应先固定后脱钙或固定、脱钙同时进行,不应先脱钙后固定,以便减少组织的损伤程度。
6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。