BI-WB004 |
ECL发光液 |
规格 | 2×100mL/2×500mL |
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【货号】 BI-WB004
【规格】 2×100mL / 2×500mL
【保存】 2~8℃,避光保存,12个月。
【产品组成】
【产品简介】
ECL发光液是基于Luminol的增强型化学发光底物试剂,可与二抗上偶联的辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)催化发生化学反应而发出荧光,结果可以通过X光片压片和其他显影技术展现。
ECL发光液具有极高灵敏度和高信噪比,发光迅速,在暗房内高丰度蛋白条带的荧光常数小时内仍然肉眼可见,X 感光胶片曝光10~30s即可得到高清晰条带;低丰度蛋白条带荧光肉眼可能不易察觉,但曝光30s~5min即可检测条带。ECL发光液衰减较慢,30min内荧光几乎无减弱,检测时产生的非特异性背景比较低,也可节省抗体和待测样品的用量,该试剂可用于PVDF膜和NC膜的Western blot免疫印迹等的发光显色。
【使用方法】
1、二抗孵育膜经数次洗涤后,用镊子将膜轻轻取出,用吸水纸略吸去过多的液体(勿接触膜的蛋白面),然后置于洁净保鲜膜上。
2、配制ECL工作液:根据需要量,取等体积的A液和B液混合即为ECL工作液,室温放置备用,工作液宜在临检测前配制,并在1h内用完。
3、滴加ECL工作液到膜上,确保使工作液均匀覆盖在膜上,约0.125mL发光工作液/cm2膜,放置1~3min。
4、取膜,弃工作液,用吸水纸略吸去过多的液体,但勿洗掉工作液。将膜放在两片保鲜膜中间(避免膜与膜之间产生气泡),随后进行压片检测或荧光成像仪检测。
5、在暗室内进行X-光胶片曝光,立即显影定影,根据结果再调整压片时间,常数秒到数分钟,然后一起显影定影观察结果。亦可采用荧光成像仪检测:将膜放置到荧光成像仪内,参考仪器说明书进行检测。
【注意事项】
1、ECL发光液A液和B液在吸取过程中必须要更换枪头,A液和B液相互污染后会导致A液或B液逐渐失效,影响后续的使用效果。
2、各溶液使用后,请盖紧瓶盖,以防失效。特别是B液,含有氧化剂,比较容易被还原而失效。
3、ECL发光液的萤光持续时间很长,但开始反应后的30min内萤光信号更强一些,随后信号会逐渐减弱,因此请注意充分利用这萤光较强的30min进行压片。
4、ECL发光液A液和B液均对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
6、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。