BP-DL002 |
改良Lillie-Mayer苏木素染色液 |
规格 | 100mL/500mL |
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【货号】 BP-DL002
【规格】 100mL/500mL
【保存】 10~30℃,避光,12个月。
【产品组成】
【产品简介】
苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE染色,是病理学和组织学最常用的一种染色方法。苏木精为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的主要成分是DNA,在DNA的双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。
改良Lillie-Mayer苏木素染色液无毒,无氧化膜,细胞核染色质着色深而细微,临床上常替代Harris苏木素染色液。对细胞核染色很清晰,不着染胞质和纤维成分,属进行性染色,故染色后可以不用盐酸乙醇分化,染色时间约5~8min,如果是充分氧化后可染色3~5min。常用于糖原等特染、酶组化和免疫组化等染色后复染细胞核作对照染色,尤其适用于经过特殊染色后不能经酸处理时对细胞核的复染。在特殊染色中,常与天青石蓝B液联合染色,使细胞核染色后不被后续的酸性染料所褪色。
【使用方法】
一、石蜡切片染色
(一)脱腊
1、切片脱蜡至水。
2、 二甲苯作用2次,每次5~10min。
3、(可选)无水乙醇作用2次,每次3~5min。
4、95%的乙醇3~5min。
5、90%的乙醇3~5min。
6、80%的乙醇3~5min。
7、 自来水或蒸馏水冲洗1~3min。
(二)染色
1、改良Lillie-Mayer苏木素染色液染色5~8min。
2、自来水或蒸馏水冲洗5~10s。
3、(可选)盐酸乙醇分化2~5s。
4、自来水冲洗20~30s。
5、(可选)蓝化液返蓝20~40s。
6、自来水冲洗30~60s。
7、伊红染色液染色30s~5min。
8、 自来水冲洗1~5s。
(三)脱水、透明、封固
1、80%乙醇10~20s。
2、90%乙醇10~20s。
3、95%乙醇作用2次,每次1~2min。
4、无水乙醇作用2次,每次2~3min。
5、二甲苯透明3次,每次2~3min。
6、中性树脂封片。
二、 冰冻切片染色
(一)乙醚-乙醇混合固定液5~10s。
(二)自来水冲洗 2~5s。
(三)改良Lillie-Mayer苏木素染色液滴染1~2min(可加热至50℃)。
(四)自来水冲洗 2~5s。
(五)(可选)盐酸乙醇分化2~5s。
(六)自来水冲洗 2~5s。
(七)(可选)蓝化液返蓝2~5s。
(八)自来水冲洗 5~10s。
(九)伊红染色液染色30s~5min。
(十)自来水冲洗 1~2s。
(十一)80%的乙醇1~2s。
(十二)95%的乙醇1~2s。
(十三)无水乙醇 2~5s。
(十四)苯酚二甲苯(1:3)2~5s。
(十五)二甲苯透明3次,每次2~5s。
(十六)中性树脂封片。
三、细胞染色
(一)4%多聚甲醛固定10~20min。
(二)自来水冲洗2次,每次2min。
(三)蒸馏水冲洗2次,每次2min。
(四)染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤,作用时间应相应缩短。
【染色结果】
【注意事项】
1、切片脱蜡应尽量干净。
2、系列乙醇应经常更换新液。
3、盐酸乙醇分化时间应根据切片厚薄、组织类别以及新旧而定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够,以便彻底清洗酸。
4、乙醚-乙醇混合固定液是由乙醚和95%乙醇等量混合而得,再加入适量乙酸,密闭保存。
5、冷冻切片染色时间尽量要短。
6、蓝化液常使用0.2~1%氨水或Scott促蓝液或0.1~1%碳酸锂溶液。
7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。