BC-CL01 |
BC Trans-DNA plus |
规格 | 1mL/1.5mL |
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【货号】 BC-CL01
【规格】 1ml/1.5ml
【保存】 2-8℃,12个月
【类型】 阳离子聚合物
【产品介绍】
BC Trans-DNA plus是一款专为难以转染的细胞设计的DNA转染试剂,它能够高效地传送质粒DNA。相较于其他转染试剂,BC Trans-DNA plus拥有卓越的DNA转染能力,其优势在于高转染效率、血清干扰小、低毒性、良好稳定性、操作简便以及出色的可重复性。
【应用范围】
BC Trans-DNA plus转染试剂表现出广泛的适用性,能够高效应对多种难转染细胞株的DNA转染需求,无论是瞬时转染还是稳定转染。特别值得一提的是,该试剂在多种贴壁细胞系中表现出色,尤其对于BMDC、4T1、CT26、DC2.4等难以转染的细胞类型,依然能够实现高转染效率,并且具备良好的重复性。
【质粒DNA转染步骤】
请确保所有操作都在无菌条件下进行,并遵循实验室的安全规范。
以24孔板为例,请参考表1的转染规模调整,步骤如下:
1. 细胞接种:在细胞培养板中,每孔接种0.5~1.0×105个细胞。将细胞在适宜条件下培养12~24小时,以确保在转染时细胞密度达到约60~70%的融合度。
2. DNA稀释:将所需的质粒DNA用Opti-MEM培养基稀释,使其终浓度达到0.1mg/mL。
3. 复合物制备:
(1)取1µL的BC Trans-DNA plus试剂原液,加入9µL的Opti-MEM培养基中。
(2)同时,取4µL浓度为0.1mg/mL的质粒DNA,加入6µL的Opti-MEM培养基中。
(3)将上述两者等体积混合,以形成转染复合物。
(4)室温静置:让转染复合物在室温下静置10分钟,以确保其充分结合。
4. 转染细胞:将20µL的转染复合物均匀加入到细胞培养板的每个孔中,并轻轻混匀。
5. 培养与检测:将细胞在37℃下继续培养18~48小时。在此期间,无需更换培养基。
【质粒DNA的转染优化】
可通过改变细胞密度、 DNA浓度以及BC Trans-DNA plus浓度对转染进行优化。保证细胞融合度在60%以上,BC Trans-DNA plus (µL):DNA (µg)可以在2:1和5:1之间调整。
表1. 不同培养板所需转染试剂和DNA的用量
培养板
接种
培养基
Opti-MEM稀
释后终体积
DNA转染
试剂用量
DNA
96孔板
0.3cm2
200µL
10µL
0.5µL
0.2µg
24孔板
2.0cm2
500µL
20µL
1µL
0.4µg
12孔板
4.0cm2
1mL
40µL
2.5µL
1µg
6孔板
10.0cm2
2mL
100µL
5µL
2µg
60mm
20.0cm2
5mL
0.2mL
10µL
4.0µg
10cm
60.0cm2
15mL
0.6mL
30µL
12µg