BC-CL05 |
BC Trans-Universal转染试剂 |
规格 | 1mL/1.5mL |
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【货号】 BC-CL05
【规格】 1ml/1.5ml
【保存】 2-8℃ , 12 个月
【类型】 阳离子聚合物
【产品介绍】
BC Trans-Universal 是一款高性能、高品质的通用型基因转染试剂,既可用于转染质粒 DNA, 又具有较强的 RNA 转染能力。BC Trans-Universal 具有不受血清影响、毒性低、稳定性好、 转染简单易行、重复性好等优点。
【应用范围】
BC Trans-Universal 转染试剂可适用于众多较难转染细胞株的 DNA/siRNA 转染、瞬时转染及 稳定转染。适用于多种贴壁细胞,特别适用于各种较难转细胞如 L929 、NIH3T3 、MCF-7 和 A549 等,均可得到较高的转染效率,且重复性好。
【 质粒 DNA 的转染步骤】
1. 质粒 DNA 的转染:
以 24 孔板为例,请参考表 1 的转染规模调整,步骤如下:
(1) 细胞接种: 每孔接种 0.5~1.0×105 个细胞,细胞培养 12~24 小时,使转染时细胞密度 达到 60~70%融合度
(2) 转染前进行换液操作,预留适当培养液可对照表 1培养基用量。
(3) 质粒稀释: 将 0.4µg 质粒稀释于 Opti-MEM 培养基中,终体积 10µL
(4) 复合物制备: 按比例取适量 BC Trans-Universal 稀释于 Opti-MEM 培养基中, 终体积 10µL,室温孵育 5 分钟后与质粒稀释液混匀
(5) 室温静置 20 分钟
(6) 每孔 20µL 复合物加入细胞培养板中,混匀,37℃培养 18~48 小时后检测基因表达, 无需更换培养基
2. siRNA 的转染
转染步骤与 DNA 相同,请参考表 1 的转染规模进行调整,所有数量和体积均是按孔计算。 转染高密度细胞可获得高转染效率、高表达水平和低细胞毒性。
【质粒 DNA 和 siRNA 的转染优化】
可通过改变细胞密度、 DNA/siRNA 浓度以及 BC Trans-Universal 浓度对转染进行优化。保 证细胞融合度在 60%以上,BC Trans-Universal (µL): DNA (µg)可以在 1:1 和 5:1 之间调整; BC Trans-Universal (µL): siRNA(pmol)可以在 0.02:1 和 0.15:1 之间调整。
表 1. 不同培养板所需转染试剂和 DNA/siRNA 的用量