BC-CL05 |
BC Trans-Universal |
规格 | 1mL/1.5mL |
产品编号 | 销售价 | 促销价 | 库存 | 数量 | 单位 | 加入购物车 |
---|
【货号】 BC-CL05
【规格】 1ml/1.5ml
【保存】 2-8℃,12个月
【类型】 阳离子聚合物
【产品介绍】
BC Trans-Universal是一款高性能、高品质的通用型基因转染试剂,既可用于转染质粒DNA,又具有较强的RNA转染能力。BC Trans-Universal具有不受血清影响、毒性低、稳定性好、转染简单易行、重复性好等优点。
【应用范围】
BC Trans-Universal转染试剂可适用于众多较难转染细胞株的DNA/siRNA转染、瞬时转染及稳定转染。适用于多种贴壁细胞,特别适用于各种较难转细胞如L929、NIH3T3、MCF-7和A549等,均可得到较高的转染效率,且重复性好。
【 质粒DNA的转染步骤】
1. 质粒DNA的转染:
以24孔板为例,请参考表1的转染规模调整,步骤如下:
(1) 细胞接种: 每孔接种0.5~1.0×105个细胞,细胞培养12~24小时,使转染时细胞密度达到60~70%融合度
(2) 质粒稀释: 将0.4µg质粒稀释于Opti-MEM培养基中,终体积10µL
(3) 复合物制备: 按比例取适量BC Trans-Universal稀释于Opti-MEM培养基中, 终体积10µL,室温孵育5分钟后与质粒稀释液混匀
(4)室温静置20分钟
(5) 每孔20µL 复合物加入细胞培养板中,混匀,37℃培养18~48小时后检测基因表达,无需更换培养基
2. siRNA的转染
转染步骤与DNA相同,请参考表1的转染规模进行调整,所有数量和体积均是按孔计算。转染高密度细胞可获得高转染效率、高表达水平和低细胞毒性。
【质粒DNA和siRNA的转染优化】
可通过改变细胞密度、 DNA/siRNA浓度以及BC Trans-Universal浓度对转染进行优化。保证细胞融合度在60%以上,BC Trans-Universal (µL): DNA (µg)可以在1:1和5:1之间调整;BC Trans-Universal (µL): siRNA(pmol)可以在0.02:1和0.15:1之间调整。
表1. 不同培养板所需转染试剂和DNA/siRNA的用量